簡(jiǎn)要描述:多糖多酚植物DNA提取試劑盒 本試劑盒采用高效、專一結(jié)合核酸的離心吸附柱和*特的緩沖系統(tǒng),適合從各種 不同的新鮮或凍存植物組織中提取基因組 DNA
詳細(xì)介紹
品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 一個(gè)月 |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),綜合 |
多糖多酚植物DNA提取試劑盒
適用范圍:多糖多酚植物 DNA 提取
試劑盒組分:
Buffer CA 100ml*2
Buffer FC 100ml*3
Buffer GW 33ml*2
Buffer GE 20ml吸附柱 200 個(gè)
保存條件:Buffer GE 4°C其它組分室溫保存
產(chǎn)品說(shuō)明本試劑盒采用高效、專一結(jié)合核酸的離心吸附柱和*特的緩沖系統(tǒng),適合從各種不同的新鮮或凍存植物組織中提取基因組 DNA,并可最大限度去除植物組織中的雜質(zhì)。本試劑盒無(wú)需使用酚/氯仿抽提,操作安全。提取的基因組 DNA 片段大、純度高、質(zhì)量穩(wěn)定可靠,適用于 PCR、熒光定量 PCR、分子標(biāo)記、文庫(kù)構(gòu)建等實(shí)驗(yàn)。
自備試劑:無(wú)水乙醇
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備及重要注意事項(xiàng)1.樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融,否則會(huì)導(dǎo)致提取的 DNA 片段較小且提取量下降。2.第一次使用前應(yīng)按照試劑瓶標(biāo)簽的說(shuō)明在 Buffer GW 中加入無(wú)水乙醇。使用前請(qǐng)檢查 Buffer CA是否出現(xiàn)結(jié)晶或者沉淀,如有結(jié)晶或者沉淀,請(qǐng)將 Buffer CA置于 65℃水浴重新溶解。操作步驟1.取植物新鮮組織 50-200mg 左右,加入液氮充分研磨。2.將研磨后的粉末收集到離心管(自備)中,加入 1ml Buffer CA,渦旋振蕩 1 分鐘,65℃水浴 30 分鐘,期間顛倒幾次,使其充分裂解。3.將離心管轉(zhuǎn)入離心機(jī)中 13,000×g 室溫離心 3 分鐘。4.小心吸取 800ul 上清到一個(gè)新的 2ml 離心管(自備),加入等體積的酚:氯仿:異戊醇=25:24:1 的混合液,渦旋振蕩 1min,室溫放置 5min。5. 13,000×g 離心 3 分鐘,小心吸取上清到一個(gè) 2ml 離心管(自備),注意不要吸到界面物質(zhì)。6.加入 2 倍體積的 Buffer FC,充分混勻(如 450ul 濾液加入 900ul Buffer FC)。注意:加入 Buffer FC 后應(yīng)立即混勻,可能會(huì)產(chǎn)生沉淀但不影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。7.將上步所得溶液和沉淀全部加入到已裝入收集管的吸附柱中,若一次不能加完溶液,可分多次轉(zhuǎn)入。13,000×g 離心 1 分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。8.向吸附柱中加入 500ul Buffer GW(使用前檢查是否已加入無(wú)水乙醇),13,000×g離心 1 分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。注意:如吸附膜呈現(xiàn)綠色,向吸附柱中加入 500ul 無(wú)水乙醇,13,000×g 離心 1 分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。9.重復(fù)步驟 8。10.13,000×g 離心 2 分鐘,倒掉收集管中的廢液。將吸附柱置于室溫?cái)?shù)分鐘,晾干。注意:這一步的目的是將吸附柱中殘余的乙醇去除,乙醇的殘留會(huì)影響后續(xù)的酶促反應(yīng)(酶切、PCR 等)。11. 將吸附柱放到一個(gè)新離心管(自備)中,向吸附膜的中間部位懸空滴加入 50ulBuffer GE 或滅菌水,室溫放置 2-5 分鐘,13,000×g 離心 1 分鐘,收集 DNA 溶液。-20℃保存 DNA。注意:1)如果下游實(shí)驗(yàn)對(duì) pH 值或 EDTA 敏感,可以用滅菌水洗脫。洗脫液的 pH值對(duì)洗脫效率有很大影響,若用水做洗脫液應(yīng)保證其 pH 值在 7.0-8.5(可以用 NaOH將水的 pH 值調(diào)到此范圍),pH 值低于 7.0 時(shí)洗脫效率不高。2)離心之前室溫孵育 5 分鐘可以增加產(chǎn)量。3)如果要提高 DNA 的終濃度,可以將步驟 10 所得的 DNA 洗脫液重新加至吸附膜上,重復(fù)步驟 10;4)因?yàn)楸4嬖谒械腄NA會(huì)受到酸性水解作用的影響,如需長(zhǎng)期保存,推薦用BufferGE 洗脫并于-20℃保存。
本產(chǎn)品僅供科研使用,請(qǐng)勿用于臨床診斷及其他用途
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